Se encuentra en la calle Las Damas de la zona colonial de Santo Domingo, su construcción se inició en 1502 por orden de Fray Nicolás de Ovando, quien escogió personalmente el lugar. La Fortaleza de Santo Domingo es la más antigua de su género en América en conservar su estructura en perfecto estado.

Ubicada en un acantilado al sudeste de la antigua Ciudad Colonial, fundada por Ovando, la fortaleza cumplía la función de cierre y defensa del puerto, desde donde se iniciaban todas las expediciones emprendidas hacia otras regiones de América al inicio de la época colonial, por lo que es considerada "eje de la conquista.

Su construcción se realizó en varias etapas, siendo la primera la erección de la llamada Torre del Homenaje, una edificación de 18.50 metros de altura que rememora un castillo medieval por su sobriedad y su tope almenado. En su interior se pueden ver diversas mazmorras y calabozos, donde, entre otras personalidades, estuvo preso Cristóbal Colón (por orden del comendador Francisco de Bobadilla). Esta edificación se realizó bajo la dirección del arquitecto Juan de Rabé.

A mediados del siglo XVI fue construido El Fuerte de Santiago, hecho en piedra y ladrillo, siendo éste la primera línea de defensa de la Fortaleza. De éste se conservan la garita, cuatro arcos y una porción del piso original.

En 1570 se construyó su "Plataforma de Tiro Alta" con una serie de cañoneras y almenas que protegían la entrada del puerto con disparos rasantes; la rampa permitía el traslado de los cañones en "cureñas" o carros especiales desde la plataforma superior.

A mediados del Siglo XVII se contruyó la "Plataforma de Tiro Baja", ésta proveía defensa mediante el disparo de cañones a blancos distantes, localizados en el mar. Todos los cañones situados actualmente en el recinto de la Fortaleza provienen de rescates submarinos de barcos antiguos.

La entrada a la fortaleza está enmarcada por un portal que se construyó en el 1787, durante el reinado del monarca Carlos III, período de gran florecimiento económico. Tiene en lo alto vestigios del escudo del Emperador Carlos V, zaspillado durante la dominación haitiana cuando toda señal de heráldica hispana quiso ser borrada.

Alrededor del 1789 España envió un fuerte contingente militar, por lo que se construyen cuarteles a todo lo largo de la Calle Las Damas. Se utiliza la cerca del Siglo XVI como muro exterior y se erige un muro paralelo interior cuyos restos son visibles. Ambos muros soportaban el techo.

El patio interior incluyó espacios con distintos propósitos: en el ala norte se encontraba la vivienda del Alcaide, donde el Virrey y Gobernador Don Diego Colón, hijo del Almirante Don Cristóbal Colón, se alojó provisionalmente en 1509 a su llegada a la colonia en compañía de su esposa Doña María de Toledo, pariente del Rey Fernando El Católico.

En el ala sur podemos apreciar un antiguo polvorín, conocido como Santa Bárbara, es una edificación de mediados del siglo XVIII. De forma rectangular, posee un techo abovedado cuyo exterior se presenta a cuatro aguas. Sus muros alcanzan los tres metros de espesor y posee una sola puerta, coronada por una hornacina con la imagen de Santa Bárbara, patrona de los artilleros. Sobre ésta se encuentra un escudo con el toisón de oro, símbolo real de Carlos III. Este edificio estaba rodeado por defensas propias, según datos históricos y vestigios arqueológicos que aún pueden observarse. Además se puede observar un profundo aljibe.